RESUMO
Abstract Objective To analyze the effects of estrogen alone or in combination with progestogens and tibolone (TIB) on the expression of the extracellular matrix metalloproteinases 2 and 9 (MMP-2 and MMP-9), of perlecan, and of heparanase (HPSE) of the vascular walls of the carotid arteries. Methods A total of 30 250-day-old ovariectomized Wistar rats were orally treated for 5 weeks with: a) 1 mg/kg of estradiol benzoate (EB); b) EB + 0.2 mg/kg of medroxyprogesterone acetate (MPA); c) EB + 0.2mg/kg of norethisterone acetate (NETA); d) EB + 2 mg/kg of dydrogesterone (DI); e) 1 mg/kg of TIB; f) placebo (CTR). Following treatment, the expression of mRNA for MMP-2, MMP-9, and HPSE was analyzed by realtime polymerase chain-reaction (PCR), and the expression of MMP-2, of MMP-9, of tissue inhibitor of metalloproteinase 2 (TIMP-2), and of perlecan was quantified by immunohistochemistry in the carotid arteries. Results The groups showed significant differences on mRNA HPSE expression (p = 0.048), which was higher in the EB, EB + MPA, and TIB groups. There was no statistically significant difference in mRNA MMP-2 or MMP-9 expression. The immunohistochemical expression of MMP-2, of TIMP-2, of MMP-9, of HPSE, and of perlecan showed no differences between groups. Conclusion Estradiol alone or associated with MPA and TIB treatment can increase mRNA HSPE expression of the walls of the carotid arteries in ovariectomized rats.
Resumo Objetivo Analisar os efeitos do estrogênio isolado ou em combinação com progestogênios e tibolona (TIB) na expressão das metaloproteinases 2 e 9 da matriz extracelular (MMP-2 e MMP-9), da perlecan e da heparanase (HPSE) das paredes vasculares das artérias carótidas. Métodos Trinta ratas Wistar ovariectomizadas com 250 dias de idade foram tratadas oralmente por 5 semanas com: a) 1 mg/kg de benzoato de estradiol (EB); b) EB + 0,2 mg/kg de acetato de medroxiprogesterona (MPA); c) EB + 0,2mg/kg de acetato de noretisterona (NETA); d) EB + 2 mg/kg de didrogesterona (DI); e) 1 mg/kg de TIB; f) placebo (CTR). Após o tratamento, a expressão de mRNA para MMP-2, MMP- 9, e HPSE foi analisada por reação em cadeia da polimerase (RCP) em tempo real, e a expressão de MMP-2, MMP-9, inibidor tecidual de metaloproteinase 2 (TIMP-2), e de perlecan foi quantificado por imunohistoquímica em artérias carótidas. Resultados Os grupos apresentaram diferenças significativas na expressão do mRNA HPSE (p = 0,048), sendo maiores nos grupos EB, EB + MPA e TIB. Não houve diferença estatisticamente significativa nas expressões de mRNA MMP-2 ou MMP-9. A expressão imunohistoquímica de MMP-2, TIMP-2, MMP-9, HPSE e perlecan não mostrou diferenças entre os grupos. Conclusão O estradiol isolado ou associado ao tratamento com MPA e TIB pode aumentar a expressão de mRNA HSPE nas paredes das artérias carótidas em ratas ovariectomizadas.
Assuntos
Animais , Feminino , Ratos , Progestinas/farmacologia , Artérias Carótidas/enzimologia , Heparina Liase/efeitos dos fármacos , Estradiol/análogos & derivados , Contraceptivos Hormonais/farmacologia , Norpregnenos/farmacologia , Progestinas/administração & dosagem , Ovariectomia , Artérias Carótidas/efeitos dos fármacos , Terapia de Reposição de Estrogênios , Regulação Enzimológica da Expressão Gênica/efeitos dos fármacos , Administração Oral , Ratos Wistar , Heparina Liase/genética , Heparina Liase/metabolismo , Proteoglicanas de Heparan Sulfato/genética , Proteoglicanas de Heparan Sulfato/metabolismo , Metaloproteinase 2 da Matriz/efeitos dos fármacos , Metaloproteinase 2 da Matriz/genética , Metaloproteinase 2 da Matriz/metabolismo , Metaloproteinase 9 da Matriz/efeitos dos fármacos , Metaloproteinase 9 da Matriz/genética , Metaloproteinase 9 da Matriz/metabolismo , Modelos Animais , Estradiol/administração & dosagem , Estradiol/farmacologia , Contraceptivos Hormonais/administração & dosagem , Norpregnenos/administração & dosagemRESUMO
ABSTRACT PURPOSE: To evaluated the role of oxidative stress on aging process in patients submitted to carotid endarterectomy. METHODS: Twenty patients were divided into two groups: older group (≥ 70 years old); and the younger group (< 70 years old). We evaluated the reactive oxygen species (ROS) concentration, nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH)-oxidase, superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities as so as nitrite levels in fragments of carotid arteries harvested during carotid endarterectomy for treatment of high grade carotid stenosis. RESULTS: We observed a higher levels of ROS and NADPH oxidase activity in the older group (p<0.05). Furthermore, the nitrite concentration was lower in the older group (14.55 ± 5.61 x 10-3 versus 26.42 ± 8.14 x 10-3 µM; p=0.0123). However, the activities of antioxidant enzymes (CAT and SOD) were similar in both the groups. CONCLUSIONS : Arterial aging is associated with increased concentrations of oxygen species and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidase activity as so as nitrite reduction in human carotid artery specimens. Maybe therapies that block NADPH oxidase activity and enhance nitrite stores would be a good strategy to reduce the effect of oxidative stress in arterial aging.